Estandarización de una técnica eficiente para el reporte de UFC / mL en muestras de orina con citolisis celular bacteriana
Palabras clave:
Citolisis celular bacteriana, Lisis química y mecánica, Ultrasonicación de baja frecuenciaResumen
Las infecciones del tracto urinario (ITU) son frecuentes en mujeres debido a la anatomía de la uretra y su proximidad con el ano.1 La citolisis celular bacteriana (CCB) describe el ingreso de bacterias al interior de las células del TU. La CCB más frecuente es por Bacilos Gram-negativos, colonizando, adhiriéndose y penetrando células de vías urinarias. La CCB no se considera en el recuento de UFC / mL en el urocultivo mediante el procedimiento convencional. El inconveniente de la técnica es que tras la CCB una innumerable cantidad de bacterias pueden situarse en una sola célula y al no promoverse la liberación de las bacterias intracelulares, solo se cuantifica una sola UFC y no el conjunto real que permanecen en el interior de la célula. Tal sub-notificación cobra significancia dado que del recuento depende la decisión de ofrecerle o no un tratamiento antimicrobiano al paciente. Este estudio pretende estandarizar una técnica eficiente para el reporte de UFC/mL en muestras de orina con CCB. Se colectaron muestra de orina. Se realizó perfil uroquímico, urianálisis, citopatológico y un recuento en placa para definir la cantidad inicial de bacterias, para su posterior comparación contra el recuento bacteriano postratamiento de lisis celular. Para evidenciar al mejor tratamiento de lisis celular: se empleó un diseño factorial completo 3x2x3x2 aleatorizado, por triplicado, cuyos factores fueron: Método de lisis (Vortex®, Ultra sonicavión de baja frecuencia (UBF), Buffer-Químico), velocidad y tiempo de exposición, y finalmente material del contenedor de la muestra (vidrio o plástico). La técnica que mayor recuperación generó y que redujo el error de cuantificación fue; UBF de la muestra contenida en vidrio, durante 30s. Sin embargo, sin importar la técnica de lisis, el sólo empleo de una, mejora sustancialmente (63-734%) la recuperación bacilar bacteriana de muestras de orina con citolisis celular bacteriana.
Citas
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